一、污水中應含有充足的電子供體（一般BOD5/TKN>4），TKN凱氏氮，水質監測指標的一項。它包括氨氮和在此條件下能轉化為銨鹽而被測定的有機氮化合物。此類有機氮化合物主要有蛋白質、氨基酸、肽、胨、核酸、尿素以及合成的氮為負三價形態的有機氮化合物。通常可以簡單的理解為水中氨氮和有機氮的總和。
二、厭氧或缺氧條件，當污水中的可降解有機物不足時，則需要額外投加營養物。CH3COOH+8NO3-→6H2O+10CO2+4N2+8OH-+能從式子中可以看出，所謂碳源并不是給反硝化提供碳，而是作為還原劑提供電子。
乙酸鈉：若以乙酸鈉（CH3COONa)作為碳源，是小分子有機酸的原因， 反硝化菌易于利用，脫氮效果是較好的。一般冬天時投加碳源，都是建議可以選擇乙酸鈉作為碳源投加，易溶于水，易被微生物所利用，所產生的污泥量相比于其他碳源時略高。